RT-PCR反转录服务
在进行目的蛋白的表达、构建表达载体等实验时,通常需要获得一段目的基因。我们可以根据您提供的已知参考序列(NCBI上已发表),以基因组DNA或总RNA为模板,获取您所需要的某个区域的一段基因。
1.服务流程
a) 总RNA抽提 b) mRNA抽提(若需要) c) 反转录合成cDNA第一链并PCR扩增双链cDNA d) 纯化PCR产物,克隆PCR产物到标准载体pUC57-T并测序(一般情况下只测1个克隆,客户若需要测序多个克隆,需另加测序费用)e) 亚克隆到其他表达载体(若需要)。一般需要2-6周的时间。
2. 服务说明
1. 我们目前接收的样品形式为与参考序列物种一致的材料或上述材料的基因组DNA/总RNA或新鲜的组织或细胞。
1) 实验材料必须保证新鲜,请您采样后立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂(如Sample Protector)
2) 基因组DNA/总RNA无明显降解,总量大于5 mg。如果基因丰度较低或调取的基因较长,为了保证实验顺利,请您提供尽量多的材料。
2. 由于材料的个体差异及PCR过程中会产生突变等原因,我们不保证获取的基因与参考序列的碱基完全一致。
3. 周期与报价
以下实验费用及周期是针对正常实验样品制定的,样品特殊或样品多时除外。
| 服务项目 |
价格(元) |
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<1000bp |
1000-2000bp |
2000~3000bp |
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总RNA抽提 |
400 |
400 |
400 |
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mRNA抽提(备选) |
600 |
600 |
600 |
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反转录合成cDNA第一链并PCR扩增双链cDNA |
500 |
1000 |
2000 |
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纯化PCR产物,克隆PCR产物到标准载体pUC57-T并测序(一般情况下只测1个克隆,客户若需要测序多个克隆,需另加测序费用) |
300 |
400 |
500 |
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亚克隆到其他表达载体(备选) |
1000 |
1200 |
1500 |
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如果片段长度大于3000bp,或有特殊的要求,须与技术客服交流讨论 |
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4.交付结果
A、实验报告
B、测序彩图
C、酶切位点图
D、含有目的基因的质粒及穿刺菌
