病毒包装服务
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腺病毒包装服务简介
腺病毒(Adenovirus,AdV)颗粒无包膜,外壳是一个二十面体结构,内部有约36kb的线性化双链( dsDNA)基因组。其宿主范围广,甚至可以感染高度分化的组织细胞。同时转染效率高、表达强度强,普遍用于基因相关疾病治疗中。
法贝生物在Adeasy、AdMax等腺病毒系统的基础上,建立了一套成熟的腺病毒包装系统。目前我们使用的以复制缺陷型腺病毒DNA为骨架构建成的第三代重组腺病毒包装系统,在穿梭载体、病毒骨架载体及包装细胞系等方面有很大优势,具有构建载体简易、快速出毒、病毒粒子稳定,病毒滴度高、安全性好等一系列优点。
腺病毒实验步骤及周期
| 实验步骤 | 实验说明 | 周期 |
| 基因合成 | 合成目的基因 | 10~15工作日 |
| 亚克隆 | 将目的基因亚克隆腺病毒重穿梭质粒中 | 5个工作日 |
| 病毒包装 | 将目的基因转移至腺病毒骨架中 | 5~10个工作日 |
| 病毒扩增及纯化 | 将确定正确的重组腺病毒质粒包装出毒并扩增至所需滴度。 | 25~25工作日 |
| 质检 | 对包装出的重组病毒进行QPCR检测,目的基因PCR鉴定 | 5~10个工作日。 |
客户提供信息
1. 客户具体需要的服务项目
2. 所要表达的外源基因的名称,序列,客户如有现成的DNA模板可提供并提供电泳图片,图谱等相关信息。
3. 所要选择的穿梭载体(我们现在可供选择具有GFP荧光标记及不带荧光标记的两种载体。
4. 所需要表达的外源基因是否要带有融合标签(如HA,c-myc,Flag等,如果需要请选择需要的标签,并选择加入标签的位置)
5. 是否需要检测外源基因的表达,如需要请提供相应的抗体。
6. 所需要的病毒滴度
7. 病毒是否需要纯化
服务发货形式
1. 我们提供插入穿梭载体目的基因的测序报告
2. 提供重组后的腺病毒载体质粒(4ug),并附上重组成功的酶切鉴定结果及对目的基因的PCR鉴定结果。
3. 对于需要包装,扩增病毒的客户,如无特殊要求我们将提供至少1ml 含108-1010病毒的未纯化的病毒液,如客户需要纯化病毒,我们将提供1ml含 1011-1012病毒的纯化后的病毒液并附上一份QC 报告,内容包括:病毒的滴度,纯度(如需纯化),复制缺陷型鉴定,病毒特征基因的PCR鉴定结果,目的基因的PCR鉴定结果。
